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層析介質(zhì)材料種類及其對生物分離性能的影響
目前市場上用于生物分離層析介質(zhì)主要由兩大類材料組成:類是以瓊脂糖,葡聚糖為代表的天然高分子層析介質(zhì);第二類是以聚乙烯和聚丙l烯酸酯為代表的合成高分子層析介質(zhì)。其中合成高分子微球可以精l確控制其粒徑大小,粒徑均勻性,并更多范圍調(diào)節(jié)孔徑大小,因此具有通透性高,分子傳質(zhì)速度快,有利于于生物大分子分離純化。合成高分子層析介質(zhì)的缺點(diǎn)是其疏水往往比軟膠大,導(dǎo)致非特異性吸附大,容易使使生物分子失去活性。因此聚合物微球表面需要進(jìn)行親水化改性以降低其非特異性吸附才能滿足層析分離的需求。
層析介質(zhì)功能基團(tuán)對生物分離性能的影響
功能基團(tuán)的物理和化學(xué)性能是影響層析介質(zhì)與目標(biāo)分子的作用的主要因素,主要決定了生物分離模式并影響其分離的選擇性和載量,因此選擇合適功能配基及密度尤其重要。另外配基與基球表面距離也會影響其介質(zhì)的分離性能,配基與基球表面距離可以通過鏈接配基和基球的手臂分子來調(diào)節(jié)。
病毒分離純化的挑戰(zhàn)與解決方案
病毒結(jié)構(gòu)通常由蛋白質(zhì)為衣殼及核酸為內(nèi)芯組成,其尺寸在20-100納米之間,與單一蛋白或核酸生物分子相比其結(jié)構(gòu)復(fù)雜得多,分子量也大很多。因此用于蛋白分離純化的層析介質(zhì)很難滿足病毒的分離純化的要求。主要原因是病毒尺寸大,而傳統(tǒng)蛋白分離純化的介質(zhì)孔徑小,因此病毒在傳統(tǒng)層析介質(zhì)的擴(kuò)散速度慢,病毒在常規(guī)蛋白層析介質(zhì)上的吸附只限于外表面一薄層區(qū)域,導(dǎo)致載量低,并使得病毒在操作中大量失活。為了滿足病毒分離純化需求,納微開發(fā)出三種病毒分離純化介質(zhì)及解決方案,分別為超大孔單分散聚合物層析介質(zhì)用于病毒分離純化;小粒徑無孔層析介質(zhì)分離純化病毒;孔徑均一的整體柱分離純化病毒。
Tantti系列的陰離子整體柱已在流l感病毒純化中取得不錯的驗(yàn)證效果,該系列產(chǎn)品批次穩(wěn)定性好,且大到能做到9cm直徑規(guī)模,可滿足中試級病毒純化需求??梢灶A(yù)期,孔徑可精l確控制且批次重復(fù)性好的整體柱一定成為病毒分離純化的理想材料。
層析分離效果很大程度上取決于層析介質(zhì)材料,層析技術(shù)重大進(jìn)步往往是隨著新的材料的出現(xiàn)而發(fā)展的。高機(jī)械強(qiáng)度超大孔結(jié)構(gòu)微球研究成功將推動傳統(tǒng)層析介質(zhì)在病毒及類病毒(疫l苗)分離純化的廣泛應(yīng)用;單分散無孔層析介質(zhì)開發(fā)成功可以極大提高病毒的純度;而以單分散微球?yàn)槟0逯苽淇讖娇煽氐恼w柱將變革病毒分離純化技術(shù)。納微將一如既往引l領(lǐng)分離純化介質(zhì)的,促進(jìn)病毒分離技術(shù)的應(yīng)用。