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武漢默沙克生物????科技有限公司是一家專門從事生物制劑研發(fā)與生產(chǎn)的企業(yè)。目前可提供各種抗1體、免疫學試劑盒、生化試劑、ELISA試劑盒、分子生物學試劑等多用途多屬種的高品質(zhì)產(chǎn)品,服務涉及分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學領(lǐng)域。
⑵在雙目解剖鏡下,用滅菌的解剖針剝?nèi)ビ兹~露出生長錐,用滅菌的解剖針挑取帶著兩至三個葉原基的生長錐。
⑶將挑好的莖尖移到MS 10.7μmol/L萘乙1酸(NAA) 4.4μmol/L6-芐基腺票呤(6-BA)的培養(yǎng)基上誘導愈傷組織形成,用封口膜將培養(yǎng)皿封好。
(4)在恒溫培養(yǎng)箱中,26℃下,培養(yǎng)六周,形成愈傷組織,經(jīng)繼代后,可用于生根培養(yǎng)
3、 細胞培養(yǎng)上清
取細胞培養(yǎng)上清到離心管,1000×g離心20min,除去細胞碎片及雜質(zhì),取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。
4、 細胞裂解液
1) 吸去培養(yǎng)板內(nèi)的培養(yǎng)基,用胰酶消化細胞,加適量培養(yǎng)基將細胞從培養(yǎng)板上吹下來。懸浮細胞可省略。
2) 收集細胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養(yǎng)基,用預冷的PBS潤洗3次。
3) 加入適量的預冷PBS或細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑1制劑)重懸細胞。通常6孔板一個孔的細胞量需要150~250μL PBS重懸。
1.3.4 敏感性
在測定血1清中某一物質(zhì)的含量時,化學比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴散法和濁度法的敏感度與酶反應法相仿。在用免疫學方法測定抗原時,應使反應系統(tǒng)中有足夠的抗1體量,否則測得的量會小于實際含量,甚至出現(xiàn)假陰性。標記的免疫測定的敏感度可提高數(shù)千倍,達ng/ml水平。例如,用放1射免疫測定法或酶免疫測定法測定HBsAg,其敏感度可達0.1ng /ml。
1.4 免疫測定在臨床檢驗中的應用
由于各種抗原成份,包括小分子的半抗原,均可用以制備特異性的抗血1清或單克1隆抗1體,利用此抗1體作為試劑就可檢測標本中相應的抗原,因此免疫測定的應用范圍極廣,在臨床檢驗中可用于測定:
1) 體液中的各種蛋白質(zhì),包括含量極1少的蛋白質(zhì)如甲胎蛋白等。