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pcr實驗室建立方法:
樣品準備和RNA-PCR RNA-PCR的額外步驟需要額外的樣品操作,這樣增加了樣品之間污染的機會。為了避免這一問題,反轉錄一步可以在樣品準備區(qū)進行。在RNA-PCR中應用UNG以防止污染的方法也有報道。
建立前PCR區(qū)。該去專門用于準備各種反應,這個區(qū)域必須保持干凈,而且沒有來自粘貼和樣品準備的污染。前PCR區(qū)必須要有試劑和準備,特別是專門用于前PCR區(qū)的正壓活塞式移液管。
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PCR實驗室應相對獨立,盡量避免與其他普通實驗套疊或者有通道上的交叉。之前看過一個圖,他們的PCR實驗室設置在檢驗科的里面,醫(yī)廢和標本的運送要穿過檢驗科的整個走廊,這種情況人、物流、污物均在同一個通道,感ran風險較高,應盡量避免。
PCR實驗室應設置以下區(qū)域:試劑儲存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)。這個4個區(qū)域在物理空間上必須完全獨立,各區(qū)域無論是空間上還是在使用中,應當始終處于完全的分割狀態(tài),不能有空氣的直接相通。根據(jù)使用儀器的功能,區(qū)域可以適當合并。每個區(qū)域間設置傳遞窗,要求一側打開時另一側無法打開。
4個區(qū)域應設置獨立的緩沖間,應設置可以通到四個操作區(qū)域的PCR走廊,在進入各區(qū)域前,應設置更衣間,每個區(qū)域的衣服可用不同顏色進行區(qū)分,在清潔區(qū)應設置洗澡間、衛(wèi)生間、值班室。還應考慮到醫(yī)廢和標本的運送通道。
無塵車間結構材料
1、潔凈室墻、頂板材料一般采用50mm厚的夾芯彩鋼板、凈化專用的氧化鋁型材制造。門采用凈化密閉門,窗采用鋁合金玻璃固定窗。
2、地面采用環(huán)氧自流平或耐磨塑料潔凈地板。
3、凈化通風管道選用鍍鋅薄鋼板制作,并采用“PEF”阻燃型的保溫板做保溫。
凈化車間,也可以稱為凈化車間或清凈室。它是污染控制的基礎。