廣州碩譜生物科技有限公司，SPE小柱，是目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。硅膠固相萃取柱品牌

常用極性固定相包括：硅膠、氧化鋁、弗羅里硅土和含有氰基(CN)、氨基(NH2)、二醇基(2 OH)的粘接硅膠。

正相態(tài)時(shí)，溶液體系的極性應(yīng)按樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞增，洗脫強(qiáng)度也隨之遞增。要確保所選的樣本溶劑不會(huì)洗脫目標(biāo)物，所選的淋洗液應(yīng)在不洗脫目標(biāo)物的前提下，很大限1度地洗脫干擾物，這樣洗脫目標(biāo)物才能碰巧完全洗脫目標(biāo)物。

因此，面對(duì)反相、正相固相萃取，在實(shí)際應(yīng)用中應(yīng)選擇哪一種？鑒于大部分化合物都具有多種功能基團(tuán)，在實(shí)際操作中，主要根據(jù)目標(biāo)物和干擾物的性質(zhì)考慮采用何種萃取機(jī)理。

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負(fù)離子交換填充物(SAX, MAX)

·分析物：陰離子(酸)化合物

·方法：

(a)活化：樣品在非極性有機(jī)溶1劑中作活化處理時(shí)，可用樣品溶劑：在極性溶劑中作樣品處理時(shí)，可用水溶性有機(jī)溶1劑作活化處理，然后用水平衡，然后用合適 pH值的緩沖液平衡。

上樣：樣品溶液的 pH值應(yīng)大于其 pKa的兩個(gè)單位(以保證其電荷)。

洗脫液 pH值：洗脫液 pKa小于兩個(gè)單位(中和分析物的電荷)。

為何在 SPE操作中會(huì)出現(xiàn)流速非常慢或流速不一致，回收率較低，且平行性差？也許很多小伙伴都遇到過(guò)這樣的問(wèn)題。小子選錯(cuò)了，方法有問(wèn)題嗎？或者填充材料的粒度分布不均勻，填充松緊度不穩(wěn)定？實(shí)際上 SPE小柱每批流速都有嚴(yán)格的質(zhì)量控制范圍，在質(zhì)量控制范圍內(nèi)的小柱可以保證穩(wěn)定的流速，超出質(zhì)量控制范圍的小柱將作為異常品處理。那么，是否可以采用一種穩(wěn)定的方法，用出廠流速測(cè)試合格

實(shí)際上還有一個(gè)很容易被大家忽視的細(xì)節(jié)也會(huì)導(dǎo)致流動(dòng)速度過(guò)慢： SPE小柱在運(yùn)輸過(guò)程中篩板和填料可能會(huì)發(fā)生微小的松動(dòng)，導(dǎo)致空氣進(jìn)入填料(一般不容易被肉眼看到)，含氣填料在氣壓下會(huì)導(dǎo)致溶劑流動(dòng)緩慢。這一點(diǎn)大家都能理解，為什么同一批小柱子會(huì)出現(xiàn)流速不平衡的情況

正壓除氣泡

試樣數(shù)量較少，填充量較小，人工施加正壓較為方便，可采用針筒連接接頭法進(jìn)行正壓排除氣泡。

□負(fù)壓排泡

試樣量較大，填料量大，人工施加正壓不便，可用真空泵連接固相萃取裝置，負(fù)壓排出氣泡。

1.2排氣泡的時(shí)間？

在 SPE操作中，一般包括平衡活化、上樣、淋洗、洗脫四步。是否每個(gè)步驟都需要一個(gè)排氣泡？但是，一般情況下，當(dāng)填料之間有空隙時(shí)，需要排出氣泡，例如，當(dāng)平衡液被激1活后，需要排出氣泡，使溶液能更好地與填料接觸。

另外還有一個(gè)容易忽略的環(huán)節(jié)也是需要排出氣泡的，一般淋洗后需要進(jìn)行抽干操作，抽干后填料間也會(huì)有空氣進(jìn)入，加入洗脫液后，也是要排出氣泡的，否則大量的氣泡也會(huì)嚴(yán)重影響洗脫液的流速和洗脫效果。

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選用 SPE柱規(guī)格的原則是，首先要確保 SPE柱的填料具有足夠的容量，以便將目標(biāo)化合物100%保留在柱體上。另外，填料也不易過(guò)量。填充物越多，溶劑對(duì)目標(biāo)化合物的洗脫效果就越好。

所以在選擇 SPE柱規(guī)格時(shí)，一定要考慮 SPE柱的容量。柱容是指一單位質(zhì)量的填料以主要力保持其質(zhì)量。鍵合型硅膠柱容量一般為1%~5%。

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例如， SPE柱的填料為100 mg，其大容量一般不超過(guò)5 mg。該離子交換劑柱容量約為0.5~1.5 meq/g。需要指出的是，由于我們面對(duì)的是多種混合物，除了目標(biāo)化混合物之外，還存在很多干擾。

因此，在選擇柱狀規(guī)格時(shí)，必須考慮到目標(biāo)化合物及其在萃取條件下可能吸附的總數(shù)量，而不能只考慮目標(biāo)化合物。另外，即使目標(biāo)化合物未超過(guò)柱容量， SPE柱在保留目標(biāo)化合物的同時(shí)也保留了部分干擾物，由于兩者的總量已超過(guò)柱容量，其結(jié)果必然是部分目標(biāo)化合物無(wú)法保留在 SPE柱中。所以為安全起見(jiàn)，建議柱容好比目標(biāo)化合物估計(jì)含量高一倍。

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清洗與干燥參數(shù)選?。喝裟繕?biāo)化合物為中性化合物，且選擇了疏水性的非極性填料(如C4、C8、C18等)，則可用水或柱子平衡的緩沖液清洗。若分析物對(duì)固相萃取柱的吸附能力較強(qiáng)，則可在洗滌液中加入水溶性，提高洗滌效果。

當(dāng)發(fā)現(xiàn)回收率下降時(shí)，收集該組分，并檢測(cè)目標(biāo)化合物是否在這一階段被洗脫。若經(jīng)調(diào)整 pH使可離子化目標(biāo)化合物中性化，并通過(guò)疏水力被 SPE柱吸附，則必須注意洗滌時(shí) pH保持不變，以免由于 pH的變化而導(dǎo)致目標(biāo)化合物在洗滌過(guò)程中丟失。

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若目標(biāo)化合物為陰或陽(yáng)離子(如采用 SAX、 PSA、NH2、 SCX、 CBA和 PRS等離子交換柱萃取)，可用柱平衡的緩沖液清洗。對(duì)帶單電分析物，緩沖液的離子強(qiáng)度不能超過(guò)50 mmol/L。對(duì)帶雙電的分析物，緩沖液的離子強(qiáng)度不能超過(guò)10 mmol/L。

水份的存在對(duì)特定環(huán)境中目標(biāo)化合物的洗脫及后續(xù)分析有一定的影響。所以 SPE柱必須先干燥，然后才能洗脫。烘干方法通常采用正、負(fù)壓力。

正壓法通常是將帶一定壓力的空氣或氮?dú)鈴?SPE柱上吹走填料中的水；負(fù)壓法則是將一定真空度從萃柱下吹走殘余的水。有時(shí)候，為了更好地去除殘余的水份，可以使用量的極性，比如50μ L。若目標(biāo)化合物易揮發(fā)，要注意控制正壓/負(fù)壓除水時(shí)間，避免在干燥過(guò)程中造成損失。