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為何在 SPE操作中會出現(xiàn)流速非常慢或流速不一致，回收率較低，且平行性差？也許很多小伙伴都遇到過這樣的問題。小子選錯了，方法有問題嗎？或者填充材料的粒度分布不均勻，填充松緊度不穩(wěn)定？實際上 SPE小柱每批流速都有嚴(yán)格的質(zhì)量控制范圍，在質(zhì)量控制范圍內(nèi)的小柱可以保證穩(wěn)定的流速，超出質(zhì)量控制范圍的小柱將作為異常品處理。那么，是否可以采用一種穩(wěn)定的方法，用出廠流速測試合格

實際上還有一個很容易被大家忽視的細節(jié)也會導(dǎo)致流動速度過慢： SPE小柱在運輸過程中篩板和填料可能會發(fā)生微小的松動，導(dǎo)致空氣進入填料(一般不容易被肉眼看到)，含氣填料在氣壓下會導(dǎo)致溶劑流動緩慢。這一點大家都能理解，為什么同一批小柱子會出現(xiàn)流速不平衡的情況

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正壓除氣泡

試樣數(shù)量較少，填充量較小，人工施加正壓較為方便，可采用針筒連接接頭法進行正壓排除氣泡。

□負壓排泡

試樣量較大，填料量大，人工施加正壓不便，可用真空泵連接固相萃取裝置，負壓排出氣泡。

1.2排氣泡的時間？

在 SPE操作中，一般包括平衡活化、上樣、淋洗、洗脫四步。是否每個步驟都需要一個排氣泡？但是，一般情況下，當(dāng)填料之間有空隙時，需要排出氣泡，例如，當(dāng)平衡液被激1活后，需要排出氣泡，使溶液能更好地與填料接觸。

另外還有一個容易忽略的環(huán)節(jié)也是需要排出氣泡的，一般淋洗后需要進行抽干操作，抽干后填料間也會有空氣進入，加入洗脫液后，也是要排出氣泡的，否則大量的氣泡也會嚴(yán)重影響洗脫液的流速和洗脫效果。

在反相-固相萃取模式中，溶劑體系的極性應(yīng)按樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞減，而溶劑體系的洗脫強度應(yīng)逐漸增加。要確保所選的樣本溶劑不會洗脫目標(biāo)化合物，所選的淋洗劑應(yīng)在不洗脫目標(biāo)化合物的前提下，很大限度地洗脫干擾物，所選的洗脫劑應(yīng)能恰巧完全洗脫目標(biāo)化合物。

作用機理：在許多固相萃取材料的極性表面和樣品中目標(biāo)化合物的極性官能團之間會產(chǎn)生極性作用力。普通吸附劑極性力作用在色譜中通常稱為正相色譜吸附劑。極性力比非極性力更強，但比離子力更弱。常用的極性基團有羥基，胺基，巰基等。由于非極性溶劑不能與極性固定相材料形成具有氫鍵的官能團，因此非極性基質(zhì)環(huán)境對吸附劑和目標(biāo)化合物之間的極性作用力是有利的。結(jié)果表明，在極性作用下，樣品的固相萃取過程中，基質(zhì)主要是非極性的，如正己烷、二氯甲1烷、菜油等，而目標(biāo)化合物中多含有極性大的官能團。

含碳量

碳量是指填料的含碳量，從側(cè)面反映了C18的修飾程度，在分離效果和目標(biāo)成分保持時間方面起著重要作用。對于相同類型的填料，高碳柱上的非極性化合物比高碳柱上的碳含量高，碳鏈增大，同時也增加了結(jié)合相的非極性作用面積。C18碳含量由不同的鍵合工藝決定，市場上C18碳含量一般在17-22%之間，也有一些特殊C18碳含量超過22%，但低于14%的C18填料。大部分樣本可以用普通碳含量的C18來解決。而C18的含碳量也并非越多越好，根據(jù)樣品性質(zhì)和純化需要選擇不同含碳量的C18，例如，極性較大的化合物在高含碳量的C18中的保留程度不如低含碳量的C18。

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固相抽提作用：濃縮：

在微量分析或制備過程中，富集目標(biāo)物是必要的。例如，分析水中 PAHs時，可將1000毫升水樣加入 SPE柱， PAHs留在柱中，然后用少量溶劑(如2毫升)洗脫，使 PAHs得到500倍濃縮，這意味著，在相同的檢測條件下，對分析物的檢測限度只有處理前的1/500。

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純化：儀器分析前先去除雜質(zhì)，這樣既避免了雜質(zhì)對目標(biāo)物的干擾，提高了分析的靈敏度，又避免了雜質(zhì)對儀器造成的損害。

變換溶劑：某些分析儀對分析物溶解溶劑有特殊要求，可采用 SPE柱變換。例如，用 GC法分析半揮發(fā)性污染物時，如果直接采用進樣法，水分將影響分離效果，損害氣相色譜柱，因此需要將溶劑轉(zhuǎn)換為溶劑。水樣品加入反相萃取柱后，目標(biāo)物在柱中與水分離，然后用對目標(biāo)物溶解性強且揮發(fā)性好的洗脫，干燥和濃縮后進行分析。