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膠凍樣類芽孢桿菌的檢測(cè)方法
膠凍樣類芽孢桿菌作為微生物肥料產(chǎn)品中的重要功能菌,如何準(zhǔn)確快速鑒別對(duì)優(yōu)良菌株篩選和產(chǎn)品檢測(cè)至關(guān)重要。
1、形態(tài)檢測(cè)或者生理生化檢測(cè)
常用的檢測(cè)方法是根據(jù)檢測(cè)的形態(tài)學(xué)或生理生化特征進(jìn)行初步判斷,然而,膠凍樣類芽孢桿菌與土壤類芽孢桿菌(P. edaphicus)是近源菌,兩者具有極其相似的菌體形態(tài)和菌落特征,生理生化性質(zhì)也很相近,因此用傳統(tǒng)的微生物檢測(cè)方法很難將兩者分開。
2、DNA測(cè)序檢測(cè)
基于16SrDNA、gyrB基因等保守序列的系統(tǒng)發(fā)育學(xué)分析方法能夠準(zhǔn)確地鑒定膠凍樣類芽孢桿菌,但需要大量測(cè)序,過程繁瑣且花費(fèi)較高,在大批量菌株的鑒定中并不適用。
3、 PCR檢測(cè)
特異PCR檢測(cè)技術(shù)具有特異性強(qiáng)、敏感度高、快速靈敏的優(yōu)點(diǎn),利用該技術(shù)進(jìn)行膠凍樣類芽孢桿菌的分類鑒定比起其他的檢測(cè)方法更加簡(jiǎn)便省時(shí),并且避免了大量測(cè)序,節(jié)省檢測(cè)成本。
HB
HB-02菌株在20 m3發(fā)酵罐發(fā)酵到終點(diǎn)的發(fā)酵液采用式離心機(jī)進(jìn)行濃縮處理,為下一步發(fā)酵液的噴霧干燥處理提供準(zhǔn)備。
設(shè)定噴霧干燥塔進(jìn)風(fēng)溫度分別為110、130、150和170 ℃,干燥后進(jìn)行芽孢收率的測(cè)定,進(jìn)而確定膠凍樣類芽孢桿菌噴霧干燥理想的進(jìn)風(fēng)溫度。
設(shè)定噴霧干燥塔的通風(fēng)量分別為10、15、20和25 m3/min,干燥后進(jìn)行芽孢收率的測(cè)定,進(jìn)而確定膠凍樣類芽孢桿菌噴霧干燥適宜的通風(fēng)量。
HB-02菌株發(fā)酵液的濃縮處理
當(dāng)HB-02菌株到達(dá)發(fā)酵終點(diǎn)后,首先將發(fā)酵液轉(zhuǎn)至儲(chǔ)罐,然后選用DHC-500型式離心機(jī)進(jìn)行離心濃縮,在得到的濃縮液中加入一定量的環(huán)糊精后,進(jìn)入噴霧干燥塔進(jìn)流干燥處理。
進(jìn)風(fēng)溫度對(duì)HB-02菌株噴霧干燥芽孢收率的影響
通過3批次試驗(yàn)證實(shí):進(jìn)風(fēng)溫度為110~130 ℃時(shí),黏壁現(xiàn)象嚴(yán)重,不易收集成品;進(jìn)風(fēng)溫度為170 ℃時(shí)黏壁現(xiàn)象輕微,成品呈粉末狀;進(jìn)風(fēng)溫度為150 ℃時(shí)能收集到粉末狀的成品,存在輕微的黏壁現(xiàn)象,樣品含水量低,菌粉的收集率在85%以上。
膠凍樣芽胞桿菌(亦稱硅酸鹽細(xì)菌)
膠凍樣芽胞桿菌(亦稱硅酸鹽細(xì)菌),俗稱鉀細(xì)菌,是農(nóng)田中較為常見的一種土壤細(xì)菌。硅酸鹽細(xì)菌作為菌肥,在前蘇聯(lián)和我國(guó)研究較早、應(yīng)用較多。
五十年代初,蘇聯(lián)學(xué)者亞歷山大羅夫首先報(bào)導(dǎo)從土壤中分離到此種特殊細(xì)菌,一些研究認(rèn)為硅酸鹽細(xì)菌(Silicate bacteria)由于其生命活動(dòng)作用可將含鉀礦物中的難溶性鉀溶解出來供作物利用,并將其稱為鉀細(xì)菌,用這類生產(chǎn)出來的肥料叫硅酸鹽菌肥,俗稱鉀細(xì)菌肥。溶磷過程主要通過兩個(gè)途徑,一是解磷細(xì)菌促進(jìn)土壤中無機(jī)磷酸鹽的溶解。
膠凍樣類芽孢桿菌具有繁殖快速、生命力強(qiáng)、安全無毒等特點(diǎn);膠凍樣類芽孢桿菌具有解磷、解鉀、固氮、大幅提高肥料利用率,減少化肥用量。
膠凍樣類芽孢桿菌是土壤中一種重要功能菌,它能分解長(zhǎng)石、云母等鋁硅酸鹽類的原生態(tài)礦物,使土壤中難溶性K、P、Si等轉(zhuǎn)變?yōu)榭扇苄怨┲参锷L(zhǎng)利用,同時(shí)還可以產(chǎn)生多種生物活性物質(zhì)促進(jìn)植物生長(zhǎng)。