ELISA試劑盒的分類

檢測抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗操作者準確地做稀釋工作，保證實驗結(jié)果的重復(fù)性。

ELISA試劑盒檢測過程中的注意事項

ELISA實驗通用規(guī)則

ELISA試劑盒——會出現(xiàn)的問題及解決辦法

標準曲線線性不佳，或是平行性不好。

a.原因：溫育位置避光不好或受到氣流干擾。

解決辦法： 請確認溫育位置既不透光也不透風(如抽屜內(nèi))。

b.原因：操作時間拖太久。

解決辦法：請在方法熟練后再進行操作。

c.原因：微孔間相互污染。

解決辦法： 加樣品時，請小心勿濺出微孔外，以免造成其它微孔的污染。

d.原因：標準品或酶標記物所加入的量不一致。

解決辦法：請使用已校正過的移液槍，并確保其與吸頭之間有高度密合性。

e.原因：添加樣品或試劑的操作方法不正確。

解決辦法：加樣品或試劑時，吸頭請勿接觸微孔。

f.原因：洗板過程發(fā)生問題(如管路堵塞、洗完板后未立刻進行下一步驟)。

解決辦法：請隨時監(jiān)控洗板過程，洗完后立即進行下一步驟。

Elisa試劑盒——Elisa實驗常見問題及解決方案

顯色淡，靈敏度偏低

1  試劑盒未充分平衡 試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開盒蓋，于室溫平衡至少20分鐘，確保所有試劑已平衡至室溫（約25℃）

2  樣品不適合做ELISA檢測 樣品一般選擇培養(yǎng)上清、血漿。其他樣品形式可能不適合做ELISA檢測或者需要優(yōu)化檢測的條件（例如稀釋液的成分）

3  酶標板在貯存或洗后拍干時過分干燥 防止板過于干燥

4  包被遭到破壞 操作溫和，移液槍不能碰到孔底

5  樣本和孵育條件不合適 按照說明書條件，建議孵育過程中全程振蕩孵育。

6  洗滌浸泡時間過長 按照說明書操作。勿人為增加浸泡時間；

7  偶聯(lián)HRP試劑污染 棄去試劑，重新配置

8  錯誤的稀釋偶聯(lián)HRP試劑 棄去試劑，重新配置

9  TMB底物孵育時間過短，因非人為因素影響，需要優(yōu)化孵育時間 確定合適的孵育時間：人為判定-高濃度的標準品出現(xiàn)深藍色；S4-5有淡藍色；機器判定620 nm波長下測定OD值達到0.6-0.65

10  樣本濃度過高或存在基質(zhì)效應(yīng) 建議做不同稀釋倍數(shù)，確認樣本稀釋倍數(shù)。

11  濾光片設(shè)置有問題或者波長選擇不對 確認儀器設(shè)置及選擇正確的波長檢測。

12  酶標板不適合做ELISA 不能使用細胞培養(yǎng)板，建議使用ELISA高吸附力板子。