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被測樣品顆粒顆粒在液相系統(tǒng)中的第二個來源是試樣。有些實驗室把樣品放入自動采樣盤(或人工進樣)之前，首先要經(jīng)過一個0.45μ m針筒式過濾器過濾。這種方法可以有效地去除樣品中的微粒。但這一過程要注意一點：你用了針筒過濾器，不可能100%獲得經(jīng)過過濾器測試的樣品，總會有或多或少的損失。損失源于以下幾個方面：過濾器過濾膜的吸附、過濾器濾出微粒的吸附、針筒濾膜過濾器與針筒連接處的滲漏等。

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如有丟失，過濾后的液體中被測物的含量或濃度是否與原始樣液的含量或濃度相同？這通常需要通過實驗加以證實。確定此步驟會增加工作量和成本。過濾是一種消耗，每臺過濾器的價格從幾元到十幾元。但是在分析食品中的殘留物時，由于底物大多比較復(fù)雜，因此過濾這一步就成為的步驟。實踐分析工作中，一般檢測每組樣品都要配外標、加回收或質(zhì)控樣品，所以只要檢測得到的信噪比達到檢出限要求，就可以認為這一步可以作為系統(tǒng)誤差而忽略。

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無過濾相的流動…由于柱塞、密封環(huán)、氣缸體和單向閥等雜質(zhì)顆粒都會磨損，因此，應(yīng)該在流動相中預(yù)先除去任何固體顆粒。好的流動相是在玻璃容器中蒸餾，而通常的過濾方法是濾過，可以使用 Millipore濾膜(0.2μ m或0.45μ m)等過濾器。泵入口處應(yīng)接砂濾棒(或片)。應(yīng)該經(jīng)常清洗或更換輸液泵的濾器。泵用后不能及時清洗移動相中不得含有腐蝕性物質(zhì)，含有緩沖液的流動相不能留在泵中，特別是當泵停泵過夜或更久時。若含有緩沖液的流動相留在泵中，可能會析出鹽的微晶，如上述固體顆粒那樣損壞密封環(huán)和柱塞，甚至只是因為溶液處于靜止狀態(tài)時，會析出。所以，必須用純水將泵完全清洗干凈，然后換成適合于保存色譜柱和有利于泵維護的溶劑(對于反相鍵合硅膠固定相，可能是或-水)。

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可流動相消失…水泵工作時要注意防止溶劑瓶內(nèi)的流動相被用完，否則泵運轉(zhuǎn)也會磨損柱塞、氣缸或密封環(huán)，終造成泄漏。如果沒有流動相的外流，沒有壓力指示怎么辦？也許是泵內(nèi)有大量的氣體，此時可開啟泄壓閥，使泵在較大流量(如5 ml/min)下運轉(zhuǎn)，排出氣泡，也可用一個50ml的針筒在泵出口協(xié)助抽氣。另外一個可能的原因是密封環(huán)磨損需要更換。

調(diào)整流量過快…防止壓力、溫度急劇變化和機械振動。氣溫驟降或使色譜柱從高處落下，都會影響柱內(nèi)填充狀態(tài)；柱壓突然升高或降低，也會對柱內(nèi)填充物產(chǎn)生沖力，所以在調(diào)節(jié)流速時要緩慢進行，在閥進樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩(如前面所述)。反向色譜柱…一般情況下，色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指示柱可以反沖時，才能反沖去除留在柱頭的雜質(zhì)。反之，反向?qū)⒀杆俳档椭?。預(yù)加保護柱為了避免破壞固定相，應(yīng)選擇合適的流動相(特別是 pH)。有時候，一預(yù)柱可以在進樣器前連接，分析柱是硅膠粘合時，預(yù)柱為硅膠，可使流動相在進入分析柱前先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)溶解。

不要把復(fù)雜的樣品，特別是生物樣品直接注入到柱中，需要對樣品進行預(yù)處理，或者在進樣器與色譜柱之間連接一個保護柱。保護柱一般為填充具有相似固定相的短柱?？梢砸矐?yīng)該經(jīng)常更換保護柱?！厩拜吔?jīng)驗】如何排除小概率故障？【1】泵壓跳動，跳動范圍約10 bar。對策：原來的小白頭有點臟，換了以后還沒有解決；2、將主動閥上的閥芯取出，發(fā)現(xiàn)類似于氣泡的存在，在超聲5分鐘內(nèi)浸入-水溶液中試著除去氣泡，重新安裝后觀察，仍未解決；更換新閥芯，安裝完畢后，再也沒有跳動，觀察一段時間后比較平穩(wěn)，順利解決。