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PCR實驗室各區(qū)功能及主要設(shè)備
試劑準(zhǔn)備區(qū):主要進行試劑的制備、分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和用于樣品制作的材料應(yīng)直接運送至該區(qū),不得經(jīng)過其它區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的試劑。本區(qū)主要設(shè)備有天平、冰箱、離心機、加樣器、振蕩器等。
擴增區(qū):主要進行DNA擴增。此外,已制備的DNA模板 (來自樣品制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來自試劑準(zhǔn)備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進行。本區(qū)主要設(shè)備有:擴增儀、冰箱、離心機、加樣器等。
PCR實驗室又叫基因擴增實驗,PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)簡稱。是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于放大特定的DNA,可以看作生物體外的特殊DNA。通過DNA基因追系統(tǒng),能迅速掌握生物體內(nèi)的病毒含量,其精準(zhǔn)度高達納米級別。
PCR實驗室注意事項——試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)
貯存試劑和用于標(biāo)本制備的消耗品等材料應(yīng)當(dāng)直接運送至試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū),不能經(jīng)過擴增檢測區(qū),試劑盒中的陽性對照品及質(zhì)控品不應(yīng)當(dāng)保存在該區(qū),應(yīng)當(dāng)保存在標(biāo)本處理區(qū)。
PCR實驗室注意事項——擴增區(qū)
為避免氣溶膠所致的污染,應(yīng)當(dāng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的走動。必須注意的是,所有經(jīng)過檢測的反應(yīng)管不得在此區(qū)域打開。
PCR實驗室布局
PCR實驗室原則上為試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴增區(qū)和擴增產(chǎn)物分析區(qū)四個單獨的工作區(qū)域并設(shè)有專用走廊,各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間,工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。
PCR實驗室注意事項——標(biāo)本制備區(qū)
為避免樣本間的交叉污染,加入待測核酸后,必須蓋好含反應(yīng)混合液的反應(yīng)管。對具有潛在危險性的材料,必須在生物安全柜內(nèi)開蓋,并有明確的樣本處理和滅活程序。
PCR實驗室通風(fēng)系統(tǒng)及壓力控制
PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,但是為避免各個實驗區(qū)域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式,嚴格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。
PCR實驗室注意事項
試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)設(shè)緊急洗眼器,以保證操作人員的安全。PCR實驗室沒有嚴格的凈化要求,可以根據(jù)用戶的使用情況和資金的投入選擇。
PCR實驗室各區(qū)功能及主要設(shè)備
擴增產(chǎn)物分析區(qū):擴增產(chǎn)物的測定。本區(qū)主要設(shè)備加樣器和水浴箱等。本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區(qū)域為負壓,以避免擴增產(chǎn)物從本區(qū)擴散至其它區(qū)域。
PCR實驗室裝飾
實驗室圍護結(jié)構(gòu)應(yīng)牢固、氣密性好;所有陰陽角宜采用圓弧過渡;墻體內(nèi)壁光潔、不積塵、耐腐蝕、易清洗消毒;地面使用PVC卷材或環(huán)氧樹脂自流坪,材料應(yīng)滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。