液相色譜儀

洗脫系統(tǒng)：

分等度洗脫和梯度洗脫

等度洗脫：流動相比例保持不變

梯度洗脫系統(tǒng)：流動相比例隨時間變化高壓梯度洗脫系統(tǒng)低壓梯度洗脫系統(tǒng)梯度洗脫主要是優(yōu)化色譜條件，達到好的分離。

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液相色譜法概述

液相色譜法(HPLC)是上個世紀七十年代迅速發(fā)展起來的一項、快速的分析分離技術，是現(xiàn)代分離測試的重要手段。色譜法的分離原理是：溶于流動相(mobile phase)中的各組分經(jīng)過固定相時，由于與固定相(station phase)發(fā)生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強弱不同，在固定相中滯留時間不同，從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。

液相色譜

HPLC對流動相的一般要求

流動相就比如人體的血液，其質量直接影響到整個系統(tǒng)的正常運行與否。

應該使用HPLC級的溶劑，不能互相混溶的溶劑不可以直接切換!一般在水相和與其不混溶的溶劑切換時，使用異作為過渡溶劑。

注意溶劑的截止波長。截止波長是指該溶劑可以在紫外檢測器中使用的低波長,低于該波長后,溶劑會有很強的紫外吸收，從而影響極限的穩(wěn)定性、干擾對所分析物質的檢測。

HPLC所使用的水必須是新鮮的和經(jīng)過0.45μm濾膜過濾過的。建議每天更換新鮮的水。長期不用時，必須把使用水的管路用置換，防止長霉。

儀器使用完后要采用適當?shù)娜軇_洗等方法維護色譜柱和系統(tǒng)。如果使用了緩沖鹽一定先將鹽要沖洗干凈。

儀器長期不用時，不建議使用純封存。因為有生成聚合物的趨勢。建議使用、/水或/水封存。

當有流路堵塞時，可以嘗試將之反接后沖洗。污染的溶劑或溶劑瓶里的藻類生長將會縮短溶劑過濾器的使用壽命，并且影響泵和系統(tǒng)的的性能。這在水溶劑或磷酸鹽緩沖液(pH 4 至7) 中尤其如此。

液相色譜常見問題

在日常工作中，遇見液相色譜儀哪些異常情況？又是如何解決的？

峰的問題：峰前沿，峰重疊，峰拖尾，鬼峰，基線漂移。

壓力問題：超壓，低壓，壓力波動。

硬件問題：日常損耗，零件損壞。

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