ELISA試劑盒的用途

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或的固相化及抗原或的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或仍保持其活性，酶標記的抗原或既保留其活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的或抗原）與固相載體表面的抗原或起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原，也可用于測定。

然而，影響Elisa試驗結(jié)果的因素很多，故加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點。

ELISA試劑盒的操作方法——間接法

以下是北京中檢維康生物技術(shù)有限公司為您一起分享的內(nèi)容，北京中檢維康生物技術(shù)有限公司專業(yè)供應(yīng)ELISA試劑盒，歡迎新老客戶蒞臨。

1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜；

2.次日洗滌3次；

3.加一定稀釋的待檢樣品（未知）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌；

4.（同時做空白、陰性及陽性孔對照）于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二（抗）0.1ml；

5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌；

6.然后用DDW洗滌。

其余步驟同“雙夾心法”的4、5、6。

ELISA試劑盒——會出現(xiàn)的問題及解決辦法

陰性標準品的吸光值低于陽性標準品的吸光值。

a.原因：微孔中的試劑未能充分混合。

解決辦法： 試劑加完后，需輕敲盤四周使其充分混合均勻。

b.原因：洗板過程發(fā)生問題。

解決辦法：請隨時監(jiān)控洗板過程，洗完后立即進行下一步驟。

c.原因：添加樣品或酶標記物的量不一致。

解決辦法：請使用已校正過的移液槍，并確保其與吸頭之間有高度密合性。

Elisa試劑盒的優(yōu)點

1．特異性強：不與其它細胞反應(yīng)。

2．重復(fù)性好：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

3．穩(wěn)定性高：實驗效果很穩(wěn)定。

4．超靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品，稀釋度和樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

以上內(nèi)容由北京中檢維康生物技術(shù)有限公司提供，如需了解更多關(guān)于Elisa試劑盒的資訊，歡迎關(guān)注本公司網(wǎng)站。