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裝柱
進行離子交換通常在離子交換柱中進行。離子交換柱一般用玻璃制成,裝置交換柱時,先在交換柱的下端鋪上一層玻璃絲,灌入少量水,然后傾入帶水的樹脂,樹脂就下沉而形成交換層。裝柱時應防止樹脂層中存留氣泡,以免交換時試液與樹脂無法充分接觸。樹脂高度一般約為柱高的90%。為防止加試液時樹脂被沖起,在柱 的上端亦應鋪一層玻璃纖維。交換枝裝好后,再用蒸餾水洗滌,關(guān)上活塞,以備使用。應當注意不能使樹脂露出水面,因為樹脂露于空氣中,當加入溶液時,樹脂間隙中會產(chǎn)生氣抱,而使交換不完全。交換柱也可以用滴定管代替。
樹脂的選擇和處理
在化學分析中應用的為強酸性陽離子交換樹脂和強堿性陰離子交換樹脂。生產(chǎn)上出廠的交換樹脂顆粒大小往往不夠均勻,故使用時應當先過篩以除去太大和太小的顆拉,也可以用水泡脹后用篩在水中選取大小一定的顆粒備用。一般商品樹脂韌含有一定量的雜質(zhì),所以在使用前必須進行凈化各種雜質(zhì),然后用蒸餾水洗滌至中性。這樣就得到在活性基團上含有可被交換的H 或Cl-的氫型陽離子交換樹脂或氯型陰離子交換樹脂。如果需要鈉型陽離子交 換樹脂,則用NaCl處理氫型陽離子交換樹脂。
對于陽離子交換樹脂常采用HCl溶液作為洗脫液,經(jīng)過洗脫之后樹脂轉(zhuǎn)為氫型;陰離子交換樹脂常采用NaCl或NaOH溶液作為洗脫液,經(jīng)過洗脫之后,樹脂轉(zhuǎn)為氯型或氫氧型。因此洗脫之后的樹脂已得到再生,用蒸餾水洗滌干凈即可再次使用。
離子交換層析法主要依賴電荷間的相互作用,利用帶電分子中電荷的微小差異而進行分離,具有較高
的分離容量。幾乎所有的生物大分子都是極性的,都可使其帶電,所以離子交換層析法已廣泛用于生物大
分子的分離、中等純化及精制的各個步驟中。