低溫生物菌種有哪些保藏法？

1、傳代培養(yǎng)保藏法：包括又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等，培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。

2、液體石蠟覆蓋保藏法：液體石蠟覆蓋保藏法是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當延長保藏時間。

3、載體保藏法：載體保藏法是將微生物吸附在適當?shù)妮d體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進行干燥的保藏法。

4、寄主保藏法：寄主保藏法用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物。

5、冷凍干燥保藏法：先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥），其中真空冷凍干燥法常見。

                                                           低溫生物菌種對沙土有什么要求？

1 沙土管制備
將河沙用60目過篩，棄去大顆粒及雜質(zhì)，再用80目過篩，去掉細沙。用吸鐵石吸去鐵質(zhì)，放入容器中用10%鹽酸浸泡，如河沙中有機物較多可用20%鹽酸浸泡。24小時后倒去鹽酸，用水洗泡數(shù)次至中性，將沙子烘干或曬干。另取地面下40～60cm非耕作層貧瘠且粘性較小的土，研碎，100目過篩,水洗至中性，烘干。將處理后的沙、土按質(zhì)量比2∶1混合?；靹虻纳惩练盅b入安瓿管或小試管中，高度為1cm左右，塞好棉塞，121℃濕熱滅菌30min。隨機抽取滅菌后的砂土管若干支，無菌條件下取少許砂土至營養(yǎng)肉汁培養(yǎng)基中，30℃培養(yǎng)24小時，檢查無微生物生長后方可使用。
      2 斜面培養(yǎng)物的制備
      參照定期移植法。
      3 制備菌懸液
     向培養(yǎng)好的斜面培養(yǎng)物中注入3～5mL無菌水，洗下細胞或孢子制成菌懸液。用無菌吸管吸取菌懸液，均勻滴入沙土管中，每管0.2～0.5mL。霉菌可直接挑取孢子拌入沙土管中。
      4 干燥
真空抽去沙土管中水分。
      5 保藏
      將沙土管用火焰熔封后存放于低溫(4～6℃)干燥處保藏，每隔半年檢查一次菌種存活性及純度?；?qū)⑸惩凉苤苯佑门Ｆぜ埢蛩芰霞埌茫酶稍锲鲀?nèi)保存。
保藏時間2～10年。
     6 恢復培養(yǎng)
     無菌條件下打開沙土管，取部分沙土粒于適宜的斜面培養(yǎng)基上，長出菌落后再轉(zhuǎn)接一次?；蛉∩惩亮Ｓ谶m宜的液體培養(yǎng)基中，增殖培養(yǎng)后再轉(zhuǎn)接斜面。