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pcr實驗室裝修
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PCR實驗室又叫基因擴(kuò)增實驗室。PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的簡稱。是一種分子生物學(xué)技術(shù),可看作生物體外的特殊DNA粘貼。通過DNA基因系統(tǒng),能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量,其精que度高達(dá)納米級別,檢測相關(guān)病du在患者體內(nèi)存在的數(shù)量、是否粘貼、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時判斷適合使用哪類抗病毒的藥、判斷藥如何、給臨床整治提供了可靠的檢驗依據(jù)。
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防止實驗污染都有哪些措施?
對于低流行地區(qū),PCR檢測人員經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn)上崗后,核酸污染的風(fēng)險相對較小,但在疫區(qū)超負(fù)荷工作時,就可能會遇到核酸污染的問題,可通過以下措施降低污染機(jī)會:
1.正確佩戴手套:手套未緊密貼合拇指、食指和中指,在進(jìn)行開蓋操作時容易發(fā)生交叉污染。
2.正確使用生物安全柜:簡單、整潔、避免通風(fēng)口堵塞;操作前后紫外線照射,消毒劑隨手可及;廢液缸里有1/3體積的含氯消毒液,并且及時清理廢液缸,保證廢物不超過廢液缸體積的2/3。
3.核酸提取儀去污染:每天多批次檢測時,在每一批次檢測完以后必須用75%的乙醇和核酸去除劑對儀器進(jìn)行去污染。
4.重視通風(fēng):不定期對房間進(jìn)行通風(fēng),每次至少持續(xù)30min。
5.PCR擴(kuò)增區(qū)去污染:PCR反應(yīng)管必須蓋緊,避免擴(kuò)增后的核酸對環(huán)境的污染。
6.實驗室隨手可及的消毒劑。
實驗室的設(shè)計與環(huán)境
①基因擴(kuò)增實驗室各分區(qū)宜配置移動紫外線燈,波長為254nm,照射時離實驗臺的高度為60~90cm。
②標(biāo)本處理區(qū)宜有二級生物安全柜。
關(guān)于采取措施防止交叉污染
①基因擴(kuò)增檢驗各工作區(qū)域需有明確的標(biāo)記,避免不同工作區(qū)域內(nèi)的設(shè)備、物品混用。進(jìn)入各工作區(qū)域需嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行,即試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。
②不同的工作區(qū)域宜使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開各工作區(qū)域時,不能將工作服帶出。
③基因擴(kuò)增實驗室需有限制進(jìn)入的標(biāo)志。
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臨床基因擴(kuò)增檢驗實驗室設(shè)計的核心問題是什么?實驗室的平面布局、空調(diào)通風(fēng) 系統(tǒng)設(shè)計、氣流控制等都是圍繞同一個核心問題進(jìn)行——“避免污染”,任何級別的醫(yī)院在建設(shè)PCR實驗室時,均需要提前考量各個因素,以保證標(biāo)本的全環(huán)節(jié)質(zhì)量及實驗室的生物安全。
1.建設(shè)要求。PCR實驗室的建設(shè)需要設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)的“四區(qū)”:試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、PCR擴(kuò)增檢測區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物檢測區(qū)。每個獨立實驗區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū),各區(qū)通過氣壓調(diào)節(jié),使整個PCR實驗過程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染,并降低擴(kuò)增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。
2.人員要求。進(jìn)入PCR實驗室,需要經(jīng)過從基礎(chǔ)理論、實驗原理、規(guī)范操作、質(zhì)量保證到注意事項等規(guī)范的培訓(xùn),并獲取PCR上崗證。
3.檢測風(fēng)險。檢測過程中,樣本的開蓋,核酸提取的震蕩、離心都有可能產(chǎn)生氣溶膠,有風(fēng)險。
4.防護(hù)要求。必須按照生物安全三級實驗室的個人防護(hù)要求進(jìn)行。