等溫核酸試劑盒

FAQ

能否對模板進(jìn)行定量?

可以。擴(kuò)增子達(dá)到可檢出水平的時(shí)間，依賴于反應(yīng)起始時(shí)的模板量。初始模板的拷貝越多，擴(kuò)增子就越快達(dá)到可檢出水平。不過，這種定量需要精心的實(shí)驗(yàn)安排，確保對照反應(yīng)是同時(shí)開始的。舉例來說，可以利用鎂離子的添加時(shí)間進(jìn)行控制。因?yàn)殒V離子一旦進(jìn)入體系，RPA反應(yīng)就會(huì)開始。

此外，較慢的擴(kuò)增過程有助于更準(zhǔn)確的定量。我們可以通過調(diào)整反應(yīng)條件或引物設(shè)計(jì)來減慢RPA的反應(yīng)速度。

核酸試劑盒

核酸檢測，是通過檢測病毒的遺傳物質(zhì)核酸而做出診斷，采用RNA逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)和PCR技術(shù)，簡單說就是使用生物技術(shù)抓取病毒獨(dú)有的核酸基因片段，然后大量復(fù)印，把它們的特點(diǎn)無限放大，這樣就可以輕松檢測到病毒了。核酸檢測試劑盒的設(shè)計(jì)本身就是針對新型冠狀病毒特有的基因片段，并且還做了特異性驗(yàn)證，用試劑盒去檢測其他相似的病毒如SARS等，檢測結(jié)果均是陰性，只有檢測病毒時(shí)才是陽性，這就確保了試劑盒的特異性，從而不會(huì)誤診。

試劑盒

自PCR技術(shù)誕生以來已經(jīng)有三十年了。從經(jīng)典PCR、實(shí)時(shí)定量PCR再到現(xiàn)在的數(shù)字PCR，這一技術(shù)在不斷蛻

變卻從未淡出我們的視野。近年來，等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)的興起無疑是對PCR的巨大挑戰(zhàn)。

等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)的基因快速診斷方法,涉及生物檢測技術(shù)領(lǐng)域,具體是用體外生物檢測試劑快速檢測病原微

生物的一種技術(shù)。

包括如下步驟:一、對被檢樣品進(jìn)行預(yù)處理;二、包括目標(biāo)靶基因數(shù)據(jù)庫的建立;生物信息學(xué)的分析比較;

基因組多態(tài)性的分型處理和簡并堿基的運(yùn)用,獲得各種靶基因的特異性引物兩對,分別與靶基因中的六個(gè)

獨(dú)立區(qū)域序列特異性匹配;三、進(jìn)行等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng);四、分析判斷結(jié)果。該方法的優(yōu)點(diǎn):不需特殊試劑與

設(shè)備;高特異性;.靈敏度高;鑒定簡便;用途廣: 可用于食品、藥品、化妝品等領(lǐng)域的質(zhì)量控制和環(huán)境、

水質(zhì)等監(jiān)測;用于醫(yī)學(xué)臨床診斷,用于代謝性疾病和遺傳疾病的基因診斷。

英國TwistDx Inc公司開發(fā)的重組酶聚合酶擴(kuò)增(Recombinase Polymerase Amplification，RPA)--被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術(shù)，目前全球新的等溫?cái)U(kuò)增檢測技術(shù)。以此為基礎(chǔ)的TwistAmp? 核酸擴(kuò)增產(chǎn)品，能夠在15分鐘內(nèi)進(jìn)行常溫下的單分子核酸檢測。該技術(shù)對硬件設(shè)備的要求很低，特別適合用于體外診斷、獸醫(yī)、食品安全、生物防御和農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。常規(guī)PCR必須經(jīng)過變性、退火、延伸三個(gè)步驟，而PCR儀本質(zhì)上就是一個(gè)控制溫度升降的設(shè)備。RPA反應(yīng)的適宜溫度在37°C - 42°C之間，無需變性，在常溫下即可進(jìn)行。這無疑能大大加快PCR的速度。此外，由于不需要溫控設(shè)備，RPA可以真正實(shí)現(xiàn)便攜式的快速核酸檢測。據(jù)介紹，RPA檢測的靈敏度很高，能夠?qū)⒑哿康暮怂?尤其是DNA)模板擴(kuò)增到可以檢出的水平，從單個(gè)模板分子得到大約1012擴(kuò)增產(chǎn)物。而且RPA還用不著復(fù)雜的樣品處理，適用于無法提取核酸的實(shí)地檢測。RPA不僅可以對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行終點(diǎn)檢測，還可以對擴(kuò)增過程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控，甚至可以通過試紙條(側(cè)流層析試紙條LFD)讀取結(jié)果。

目前，TwistAmp? 試劑盒的擴(kuò)增子長度在500bp以內(nèi)。不過，經(jīng)過特別優(yōu)化的RPA擴(kuò)增，也可以生成更長的擴(kuò)增產(chǎn)物，或者減慢擴(kuò)增速度(便于定量)，甚至在更低的溫度下進(jìn)行反應(yīng)。