等溫核酸試劑盒

重組酶聚合酶擴增技術（RPA)是2006年由英國科學家研發(fā)的一種核酸恒溫擴增技術。它是利用多種酶參與，在體外模擬生物體內DNA復印，恒溫條件下短時間內實現靶基因大量擴增，既可以擴增DNA，也可以擴增RNA。RPA技術具有恒溫、快速、便攜、靈敏度高、特異性強和操作簡單等優(yōu)點，是目前很有望替代PCR技術的核酸等溫擴增方法，在基層現場診斷中，具有廣闊的應用前景。

相對來說RPA是很好的恒溫擴增法，可在較低溫下恒溫擴增，不需要復雜儀器設備，操作簡單、反應時間短，特異性好、靈敏度高，可采用電泳、熒光、側向流試紙等多種方式檢測擴增產物。

普通的提取實驗用國產的試劑盒就足以，價格不高，基本上各地均有現貨，如天根（目前國內生產的試劑盒中銷售面比較廣的一種）等，其價格比進口試劑盒要便宜許多，且效果還不錯，性價比還可以。

當然，就RNA的提取而言，不一定試劑盒的提取效果就非常好，其實采用一些經典的RNA提取方法，效果也很不錯，如：TRIZOL、EDTA等，只是試劑盒使用方便，經典的方法操作復雜一些。

FAQ

1 RPA能實現多重化嗎?

可以。RPA技術支持在同一個管中同時進行多個擴增反應。不過，多重化的引物組合需要精心設計，以便每個引物都能同樣有效的工作。需要注意的是，RPA反應的引物總量(nmol)不要超標太多。如果在一個反應中使用兩個以上的擴增引物，就應該控制不同引物的量。另外，我們應當事先考慮好檢測多個擴增事件的探針、設備以及熒光團的兼容性。

數字PCR法和熒光PCR法的關鍵區(qū)別在于檢測結果的定量和相對定量差異。據了解，現階段數字PCR試劑和機器相價格加高（一臺儀器近百萬元），在SARS-CoV-2快速檢測中的優(yōu)勢并不大。

不過，由于具備自動化程度更好、耗時更短等技術優(yōu)勢，國內多家掌握了數字PCR技術的核酸試劑研發(fā)企業(yè)正在嘗試開發(fā)適用于SARS-CoV-2檢測的相關試劑盒。