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液相色譜的五大系統(tǒng)
1、進樣系統(tǒng)進樣系統(tǒng)分為手動進樣閥和自動進樣器。
2、輸液系統(tǒng)輸液泵按輸出液恒定的因素分恒壓泵和恒流泵。對液相色譜分析來說,輸液泵的流量穩(wěn)定性更為重要,這是因為流速的變化會引起溶質的保留值的變化,而保留值是色譜定性的主要依據(jù)之一。因此,恒流泵的應用更廣泛。
輸液泵按工作方式分為氣動泵和機械泵兩大類。機械泵中又有螺旋傳動注射泵、單活塞往復泵、雙活塞往復泵和往復式隔膜泵。
3、分離系統(tǒng)分離系統(tǒng)包括色譜柱、保護柱以及柱溫箱。
色譜柱:色譜柱是樣品分離的核心。色譜柱在使用前必須仔細閱讀說明書,了解色譜柱使用的pH值范圍、溶劑耐受范圍、壓力范圍和維護方法等事項。色譜柱使用完后,需及時對色譜柱進行沖洗。沖洗完成后,應該將色譜柱從儀器上拆下來,兩端用廠家配的堵頭密封后,保存在色譜柱盒里。
保護柱:保護柱的作用主要是防止吸附性強的雜質對色譜柱污染,從而延長色譜柱的壽命。針對不同型號的色譜柱,應選擇相對應填料的保護柱。應注意柱芯也是有壽命的,應該定期進行更換。
柱溫箱:色譜柱溫度變化,可能會導致保留時間的變化。為了避免這個問題,建議使用柱溫箱。
4、檢測系統(tǒng)液相色譜常用的檢測器有紫外檢測器、示差折光檢測器和熒光檢測器三種。
5、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)該系統(tǒng)可對測試數(shù)據(jù)進行采集、貯存、顯示、打印和處理等操作,使樣品的分離、制備或鑒定工作能正確開展。
半制備液相色譜需要哪些
在半制備液相色譜設備生產(chǎn)中,也有多方面的實力要求,只有全方面的生產(chǎn)實力之下,才能保證它的。那么這種儀器需要有哪些方面的生產(chǎn)實力呢?首先,它需要有更好的生產(chǎn)科技力量。本身這種檢測儀器就有更高的科技含量,當一個廠家沒有更好的科技實力之時,也就沒辦法讓其有更好的保證。
市場上面有些儀器在工作之時沒有更多功能,在分析中沒有更好的適應性,同時在整個靈敏性上也有一定的下降,更多的都是受到生產(chǎn)商的科技實力不足。之所以很多品牌產(chǎn)品能受到用戶的喜歡,正是因為它的科技實力強。再者,就是在這種產(chǎn)品的生產(chǎn)中,也需要很好的設計實力,這種產(chǎn)品的使用過程中,有什么樣的方便性,是不是在外形上有更小的體積,也都是受到這方面的影響。
液相色譜法的常見問題
樣品準備是成功的關鍵;在將所有樣品加載到自動進樣器中之前,必須對所有樣品進行過濾,這一點非常重要。當使用UHPLC時,如果不過濾樣品,使用亞2微米顆粒的色譜柱進行高效分離時很容易發(fā)生阻塞,這一點就尤為重要。對于流動相也是如此,尤其是在使用緩沖區(qū)的情況下。
對于樣品使用正確的進樣溶劑或稀釋劑至關重要,溶劑強度應等于或小于流動相起始條件的強度。如果使用太強的溶劑,則會觀察到峰分裂和重現(xiàn)性差。如果自動進樣器中使用的清洗溶劑太強,可能會觀察到類似的問題。